TGFβ1shRNA对293细胞合成TGFβ1的干扰作用

• 作者: 刘海英 文妍 柳国胜 王志军 罗瑶
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 转化生长因子β1 RNA干扰 293细胞
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 420-424
• 页数: 5页
• 分类号: R587.1|R322.1
• 字数: 3048字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2009.04.014

摘要

目的:探讨自行设计的TGFβ1shRNA对293细胞TGFβ1基因表达的干扰作用,为研究纤维化病变的基因治疗方法提供技术基础和依据.方法:针对大鼠TGFβ1基因mRNA序列,设计、合成携带3条TGFβ1 shRNA和TCFβ1基因的绿色荧光蛋白融合表达质粒载体,并设阴性质粒组和空质粒组为对照,通过脂质体包裹分别转染293细胞.转染后24、48和72 h收集细胞,在荧光显微镜下观察干扰效果,采用荧光定量PCR检测TGFβ1基因表达情况,并计算干扰效率.结果:荧光显微镜下观察,可见转染后24、48和72 h TGFβ1shRNA质粒组细胞绿色荧光强度均明显弱于阴性质粒组细胞,空质粒载体组未产生绿色荧光;荧光定量PCR检测转染后293细胞TGFβ1mRNA表达量,转染后24、48和72 h TCFβ1shRNA质粒组TCFβ1mRNA表达量均显著低于阴性质粒组(P<0.01),其基因干扰效率则依次递减,分别为97.2%、97.1%和67.7%.结论:本研究证明自行设计的TGFβ1shRNA转染293细胞后24、48和72 h TGFβ1shRNA均能够高效干扰TGFβ1基因的表达,其基因干扰效率呈现一定的时间依赖性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	柳国胜	暨南大学附属第一医院儿科	116	770	15.0	23.0
2	罗瑶	暨南大学附属第一医院儿科	7	41	4.0	6.0
3	王志军	暨南大学附属第一医院儿科	4	10	2.0	3.0
4	文妍	暨南大学附属第一医院儿科	2	3	1.0	1.0
5	刘海英	暨南大学附属第一医院儿科	7	30	3.0	5.0