一种新型速效人胰岛素类似物的构建、制备及性质研究

• 作者: 刘景晶 刘素丽 曹荣月 李泰明 王学军 范豪 鲁勇
• 来源期刊: 东南大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 融合表达 速效人胰岛素类似物 单体胰岛素 药效学活性
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 371-375
• 页数: 5页
• 分类号: R587.1|Q784|Q786
• 字数: 4427字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6264.2009.05.003

摘要

目的: 构建和制备出一种新型速效人胰岛素类似物(PIns),进行其性质研究.方法: 采用加端PCR的方法,扩增出在天然人胰岛素原N端添加精氨酸、脯氨酸、赖氨酸、脯氨酸4个氨基酸残基的重构胰岛素原基因片段,将其插入通用表达载体pET28a后,再将经过改构后的硫氧还蛋白(1-20aa)的基因片段与重构胰岛素原基因的5′端通过赖氨酸连接,成功构建了速效人胰岛素原类似物融合蛋白(FKPPIns)的表达载体(pET28a-FKPPIns).此融合蛋白在大肠杆菌BL-21(DE3)中以包涵体的形式表达,经包涵体洗涤和DEAE阴离子交换树脂纯化后进行复性、酶切.酶切产物经RP-HPLC纯化后,质谱法测定其分子量;等电聚焦法测定此蛋白的等电点;凝胶过滤法测定其自身的缔合性质.对新西兰大白兔肌肉注射纯化后PIns,进行初步的药效学评价.结果: 获得了结构为R-P-K-P-Insulin的PIns纯品,其等电点为7.3,自身缔合性较标准胰岛素显著下降.结论: PIns与标准人胰岛素相比,起效快、达峰时间及持续时间短.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘景晶	中国药科大学微基因药物实验室	116	553	12.0	18.0
2	王学军	中国药科大学微基因药物实验室	6	19	3.0	4.0
3	曹荣月	中国药科大学微基因药物实验室	61	129	6.0	8.0
4	刘素丽	中国药科大学微基因药物实验室	1	5	1.0	1.0
5	鲁勇	中国药科大学微基因药物实验室	8	12	2.0	3.0
6	范豪	中国药科大学微基因药物实验室	1	5	1.0	1.0
7	李泰明	中国药科大学微基因药物实验室	33	110	6.0	8.0