丙型肝炎病毒截短型核心基因表达载体的构建与表达

• 作者: Hiroaki Kohno 孙贝贝 张军 张敬 石红军
• 来源期刊: 同济大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 丙型肝炎病毒 核心蛋白 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 50-53
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 字数: 2659字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建重组丙型肝炎病毒核心基因表达载体pVec-core,并进行原核表达.方法 人工合成丙型肝炎病毒截短型核心基因至pUC57载体上,经双酶切后,将其克隆至原核表达质粒pVec中,测序正确后将重组质粒pVec-core转化入表达宿主菌BL21,经IPTG诱导表达核心蛋白,SDS-PAGE检测目的 蛋白的表达情况.采用GST亲和层析方法纯化融合蛋白并进行Western印迹法验证.结果 丙型肝炎病毒核心基因表达载体构建成功,重组菌表达出相对分子质量约为40.6 kD重组融合蛋白,并以可溶形式存在于菌体中.蛋白经谷胱甘肽琼脂糖凝胶纯化,得到纯度较高的目的蛋白.经Western印迹分析,该蛋白可与HCV患者阳性血清发生特异性结合反应,具有良好的抗原活性.结论 核心抗原表达载体在原核表达系统中高效表达,为利用其作为诊断抗原及研究核心蛋白的其他生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张军	同济大学基础医学院生物学教研室	100	1056	15.0	29.0
2	石红军	同济大学基础医学院生物学教研室	29	200	8.0	12.0
3	张敬	同济大学生命科学与技术学院	55	302	11.0	14.0
4	孙贝贝	同济大学基础医学院生物学教研室	2	2	1.0	1.0