人颗粒溶素活性肽和小鼠单链白细胞介素-12重组卡介苗的构建及鉴定

• 作者: 何永林 帖儒修 张黎 王瑜伟
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 颗粒溶素 白细胞介素-12 重组卡介苗 真核表达
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 556-559
• 页数: 4页
• 分类号: R3|Q781
• 语种: 中文

摘要

目的 构建含人颗粒溶素(GLS)活性肽和小鼠单链白细胞介素-12(mIL-12)基因的重组卡介苗(BCG),并鉴定其向真核细胞递呈质粒的能力.方法 以分子生物学方法构建含相对分子质量为9 000的颗粒溶素活性肽基因和小鼠IL-12基因及分枝杆菌复制子OriM的真核穿梭共表达质粒pBM9,以电转化的方式将pBM9质粒转入BCG,构建重组BCG,抽提质粒进行PCR鉴定;将重组菌感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,经RT-PCR检测重组菌向真核细胞递呈质粒的能力.结果 重组BCG可扩增出与GKS基因和mIL-12基因相符的目的条带.重组BCG感染RAW264.7细胞96 h后,经RT-PCR可扩增出267 bp的GLS基因条带和1 632 bp的mIL-12基因条带.结论 已成功构建含GLS和mlL-12基因的重组BCG,该重组BCG能向小鼠巨噬细胞递呈携带的目的基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张黎	重庆医科大学附属第一医院眼科	58	140	6.0	8.0
2	何永林	重庆医科大学免疫学教研室	49	129	6.0	7.0
3	帖儒修	重庆医科大学免疫学教研室	8	14	2.0	3.0
4	王瑜伟	重庆医科大学免疫学教研室	15	21	3.0	3.0