幽门螺杆菌Cag致病岛hp0527基因的缺失株构建和鉴定

• 作者: 母润红 田树伟 邵世和 钟桥 韩军 黄河
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 Ⅳ型分泌系统 同源重组 突变体
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 932-935,939
• 页数: 5页
• 分类号: R372
• 字数: 3943字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建幽门螺杆菌(H.pylori)Cag致病岛编码hp0527基因的突变株.为Cag致病岛致病机制及H.priori功能研究奠定基础.方法:利用基因同源重组方法将卡那霉素抗性基因(KanR)连接到PCR扩增hp0527两端区域产生的2个目的基因片段之间,构建hp0527基因缺失的自杀质粒pBlueKM40-△hp0527;将带有卡那霉素抗性标志的缺失突变载体,通过抗生素卡那霉素筛选出缺失hp0527基因的突变株,并经PCR方法鉴定后,采用野生株和突变株的幽门螺杆菌分别与胃癌上皮细胞BGC-823共培养后,分析它们对细胞毒素相关蛋白CagA转运能力的影响.结果:成功构建出幽门螺杆菌hp0527基因突变的自杀质粒,突变载体经内切酶酶切分析显示:产生的条带与设计结果完全一致;抗生素筛选并经PCR鉴定后,获得了hp0527基因缺失株;CagA蛋白转运分析表明基因hp0527缺失前后,可以导致细菌转运CagA蛋白能力的丧失.结论:成功构建出1株缺失hp0527基因的H.pylori突变株,对于阐明该基因的功能及其在H.pylori致病中的地位及作用具有重要的研究价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵世和	江苏大学基础医学与医学技术学院病原生物学研究室	99	382	9.0	14.0
2	母润红	北华大学医学检验学院	10	10	2.0	2.0
3	黄河	江苏大学基础医学与医学技术学院病原生物学研究室	13	31	3.0	5.0
4	田树伟	江苏大学基础医学与医学技术学院病原生物学研究室	6	9	2.0	2.0
5	韩军	江苏大学基础医学与医学技术学院病原生物学研究室	6	9	2.0	2.0
6	钟桥	江苏大学基础医学与医学技术学院病原生物学研究室	7	14	2.0	3.0