siRNA靶向稳定干扰HDGF基因胃癌细胞株的建立

• 来源期刊: 南华大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: HDGF基因 siRNA 稳定干扰 胃癌细胞
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 肿瘤学研究
• 页码范围: 521-524
• 页数: 4页
• 分类号: R735.2
• 字数: 2757字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建针对肝癌衍生生长因子(HDGF)基因的siRNA表达载体,建立稳定干扰HDGF表达的胃癌细胞株. 方法 常规聚合酶链反应(PCR)检测HDGF基因在胃癌SGC-7901细胞株的表达情况.构建重组靶向HDGF shRNA慢病毒表达质粒pLentiU6/ HDGFshRNA,用脂质体转染的方法将载体导入胃癌细胞株.经杀稻瘟菌素筛选后,建立稳定表达siRNA的细胞株.荧光定量PCR检测干扰效率. 结果 在胃癌SGC-7901细胞株中,HDGF显示高表达.测序验证pLentiU6/HDGFshRNA重组质粒构建成功;在将干扰表达质粒稳定转染入胃癌细胞株后能明显抑制HDGF mRNA表达水平. 结论 成功构建了pLentiU6/HDGFshRNA慢病毒重组质粒,建立了稳定靶向干扰HDGF表达的siRNA胃癌细胞株.