长角血蜱雄蜱抑制消减杂交cDNA文库的构建与分析

• 作者: 刘光远 刘建刚 张丽艳 田占成 谢俊仁 龚真莉
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 长角血蜱 抑制消减杂交(SSH) cDNA文库
• 年，卷（期）: 2009,（8）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 659-664
• 页数: 6页
• 分类号: S852.746
• 字数: 4397字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.08.001

摘要

为构建长角血蜱雄蜱抑制消减杂交cDNA文库,获得长角血蜱雄性成蜱在半饱血状态下的特异表达基因,用抑制消减杂交方法构建以pGEM-T Easy为载体的长角血蜱半饱血雄蜱全蜱cDNA文库,测序并进行生物信息学分析.以新合成的长角血蜱饥饿和半饱血雄蜱cDNA第一链为模板,用RT-PCR方法对从文库中挑选的5个表达序列标签(EST)进行鉴定.初步获得18个EST,BlastX分析显示,所得cDNA编码的功能性蛋白主要包括信号传导、组织形态形成、转录调节和糖类代谢等相关蛋白.RT-PCR鉴定结果显示,随机挑选的5个新EST中有3个在半饱血状态下差异表达.结果表明,成功地构建了长角血蜱雄性全蜱抑制消减杂交文库,获得了有潜在生物学功能的EST.