镰形扇头蜱半饱血雌蜱cDNA文库的构建

• 作者: 周勇志 周金林 张维谊 龚海燕
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 镰形扇头蜱 半饱血雌蜱 cDNA文库
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 485-488
• 页数: 4页
• 分类号: S852.746
• 字数: 2851字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.06.007

摘要

目的为了筛选抗蜱及蜱传疾病基因工程疫苗的抗原候选分子,构建了镰形扇头蜱半饱血雌蜱cDNA表达文库.方法用Trizol试剂提取镰形扇头蜱半饱血雌蜱总RNA,经反转录合成cDNA第一链,应用长链PCR(LD-PCR)扩增方法,合成双链cDNA.双链cDNA(ds cDNA)在SfiⅠ内切酶的作用下,形成两端分别带有SfiⅠA和SfiⅠB的粘性末端.经CHROMA SPIN-400柱纯化,收集500bp以上的双链cDNA片段,将其连接于带有SfiⅠA和SfiⅠB末端的λTriplEx2噬菌体载体,经体外包装后,以XL1-Blue为受体菌构建cDNA噬菌体表达文库.结果经测定,库容量为4.2×106,重组率为96%.扩增后的文库滴度为2.04×1010pfu/ml.通过对文库中随机挑选的15个克隆进行序列分析,获得一个编码线粒体ATP酶第6亚基蛋白的全长cDNA序列.结论结果显示,镰形扇头蜱半饱血雌蜱cDNA表达文库已构建成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周勇志	中国农科院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室	9	104	5.0	9.0
2	周金林	中国农科院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室	12	118	5.0	10.0
3	龚海燕	中国农科院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室	4	92	3.0	4.0
4	张维谊	中国农科院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室	1	17	1.0	1.0