镰形扇头蜱丝氨酸蛋白酶SP30基因的克隆及原核表达

• 作者: 关洁 周勇志 周金林 张厚双 曹杰
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 镰形扇头蜱 丝氨酸蛋白酶SP30基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 45-50
• 页数: 6页
• 分类号: S852.746
• 字数: 3235字
• 语种: 中文

摘要

根据丝氨酸蛋白酶保守性氨基酸序列设计引物,以镰形扇头蜱半饱血雌蜱cDNA为模板,经PCR扩增得到SP30基因的保守区,通过5＇RACE（rapid amplification of cDNA Ends）和3＇RACE技术得到全长基因。将该基因连入原核表达载体pGEX-4T-1,经IPTG诱导纯化得到重组蛋白。以镰形扇头蜱卵、幼蜱、若蜱、成蜱各发育阶段的cDNA为模板进行Real-timePCR实验。结果显示,SP30基因全长1194 bp,开放阅读框长900 bp,编码299个氨基酸,预计蛋白分子质量30 kDa。Real-time PCR分析结果表明,该基因在四个不同的发育阶段均有不同程度的表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周金林	中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室	74	410	11.0	17.0
2	张厚双	中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室	25	79	5.0	7.0
3	曹杰	中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室	79	405	11.0	15.0
4	周勇志	中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室	48	227	9.0	13.0
5	关洁		1	1	1.0	1.0