红外荧光标记蛋白检测方法的优化

• 作者: 吕延杰 张勇 张容姬 张莹 杨宝峰 王玉平 王莹 陈艳艳
• 来源期刊: 哈尔滨医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 间隙连接蛋白43 免疫印迹 Odyssey双色红外荧光扫描成像系统 双标记
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 111-113,117
• 页数: 4页
• 分类号: R34
• 字数: 2582字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1905.2009.02.001

摘要

目的 应用Odyssey双色红外荧光扫描成像系统定量检测蛋白质,通过对免疫印迹中转印膜和封闭液的筛选及抗体双标记的应用,优化红外荧光标记的蛋白检测方法.方法 ①差速离心法提取大鼠心肌组织膜蛋白,在转膜和封闭过程中比较了4组方案,通过对不同方案蛋白转印效率和背景噪音强度的差异比较,筛选最佳转印膜和封闭液;②运用抗体双标记的方法来研究不同种或不同形式蛋白在同一泳道的检测情况.结果 ①PVDF膜和脱脂奶粉封闭液结合应用,蛋白显现更清晰;②双重标记间隙连接蛋白43,同时检测到该蛋白两种形式.结论 VDF膜、脱脂奶粉封闭液及抗体双标记的使用可以取得更好的红外荧光标记的蛋白检测结果.