抗人DR5单克隆抗体的制备、鉴定及活性分析

• 作者: 何琼 刘忠臣 庄国洪 张长弓 李文珠 杨东海
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 死亡受体5 TRAIL 单克隆抗体 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 671-675
• 页数: 5页
• 分类号: R34
• 语种: 中文

摘要

目的 制备抗人DR5单克隆抗体(mAb),鉴定其特性,并进行生物学活性分析.方法 以纯化的可溶性DR5(sDR5)免疫Balb/c小鼠,杂交瘤技术制备抗人DR5 mAb;运用ELISA、SDS-PAGE电泳方法测定抗DR5 mAb与sDR5结合的特性;Ig亚类ELISA试剂盒鉴定抗DR5 mAb亚类;间接ELISA法检测腹水mAb效价;流式细胞仪检测肿瘤细胞表面DR5的表达水平;流式细胞仪检测抗DR5单克隆抗体(mAb)诱导肿瘤细胞凋亡的功能.结果 获得1株可分泌抗DR5 mAb的杂交瘤细胞系R150.SDS-PAGE电泳检测证实,获得的R150可特异性地识别DR5;R150的Ig亚类为IgGI(λ型);腹水效价为1×106;通过流式细胞仪可敏感地检测到肿瘤细胞表面DR3的表达水平及R150诱导肿瘤细胞凋亡情况.结论 获得1株可分泌抗DR5 mAb的细胞系R150,抗体具有效价高、特异性强等特点并能有效诱导肿瘤细胞凋亡,具有较好的应用价值.