摘要:
目的: 探讨小干扰R N A 降低环氧化酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)基因对肝癌细胞He pG2增殖与细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)表达的影响.方法: 将人肝癌细胞株HepG2细胞分为4组:COX-2 siRNA干预组、阴性对照siRNA组、空脂质体组、空白对照组. 脂质体转染法将COX-2 siRNA转染入HepG2细胞; MTT法测定转染后24, 48, 72 h的增殖抑制率; 流式细胞仪测定转染后24 h的细胞周期分布; 半定量RTPCR与Western blot检测转染后24 h肝癌细胞COX-2和ERK1/2的表达.结果: COX-2 siRNA干预组的增殖抑制率明显高于阴性对照组和空脂质体转染组(67.08%vs 2.45%, 1.56%, 均P<0.01); COX-2 siRNA干预组G1期细胞明显增多, 与空白组、空脂质体组及阴性对照组相比, 均具有显著差异(72.80% vs 50.27%, 50.97%, 53.13%, 均P<0.05); RT-PCR显示: COX-2 siRNA干预组COX-2, ERK1, ERK2 mRNA表达(0.58, 0.32,0.48)明显降低, 与空白组(0.93, 0.76, 0.72)、空脂质体组(0.89, 0.64, 0.67)及阴性对照组(0.83, 0.71, 0.65)比较, 差异具有统计学意义(均P<0.05), Western blot显示以上各项指标表达趋势与RT-PCR相同.结论: 小干扰RNA可降低肝癌细胞He pG2的COX-2基因表达, 抑制肝癌细胞的生长.COX-2促进肝癌生长可能与ERK1/2通路调控有关.