小金海棠Fe3+-螯合还原酶MxFRO2基因启动子的克隆与表达分析

• 作者: 任玲 孔瑾 文静 王忆 许雪峰 韩振海
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小金海棠 三价铁螯合还原酶 启动子 瞬时表达
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 114-120
• 页数: 7页
• 分类号: S188
• 字数: 4227字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.01.019

摘要

通过染色体步移法从小金海棠(Malus xiaojinensis)基因组中克隆了三价铁螯合还原酶(ferric chelate reductase,MxFRO2)基因翻译起始位点上游1 738 bp的启动子序列.生物信息学分析表明,该启动子片段中存在光响应元件G-box、生长素应答元件、铜元素响应元件、TATA-box、CAAT-box等顺式作用元件.从TAIR网站获得了拟南芥(Ambidopsis thaliana)中8个FRO基因上游的启动子序列,通过PlantCARE分析了其与MxFR02启动子的异同.根据在线预测结果,克隆了翻译起始位点上游1 644 bp(MxFul)和259bp(MxD1)两段序列,构建了其与GFP融合的瞬时表达载体,并将重组质粒通过PEG介导法分别转化拟南芥叶片原生质体,结果表明,小金海棠MxFul和MxD1两段启动子序列都能驱动GFP蛋白在拟南芥原生质体中的瞬时表达.