人剪切修复基因XPD对肝癌细胞生长的抑制作用

• 作者: 尹东 张吉翔 徐江晶 李军 熊瑛 黄神安
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 肝癌 XPD c-myc cdc25A cdK2 DNA损伤检控点
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 81-85
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/J.issn.1000-8578.2009.02.001

摘要

目的 探讨野生型人剪切修复基因着色性干皮病基因D(xeroderma pigmentosum D,XPD)对肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响,井探讨其机制.方法 用脂质体格染法瞬时转染SMMC-7721细胞,转染重组质粒XPD-N2和空载质粒N2,并用未转染的与XPD-N2、N2具有相同遗传背景和代数的SMMG7721细胞作为空白对照.荧光显微镜观察绿色荧光蛋白报告基因表达情况,流式细胞仪检测细胞周期,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法检测细胞中XPD、c-myc、cdc25A、cdK2表达量变化,MTT法观察细胞增殖的活力.结果 提取出的重组质粒pEGFP-N2-XPD用酶切鉴定,与Genebank上的相符.在荧光显微镜下,可以在SMMC-7721-pEGFP-N2,5MMC-7721-pEGFP-N2-XPD细胞中观察到绿色荧光蛋白的表达,质粒的转染效率为30%左右.流式细胞议结果显示,pEGFP-N2-XPD重组质粒转染入细胞后,肝癌细胞进入S期发生阻滞,停滞在G1期.RT-PCR、Western blot检测发现SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD细胞与SMMC-7721-pEGFP-N2和SMMC-7721两对照组相比,其XPD表达明显增高(P<0.05).c-myc、cdc25A,cdK2相对表达量明显减少,差异有统计学意艾(P<0.05).与两对照组相比,SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD细胞增殖率明显减弱(P<0.05).结论 野生型XPD基因可以在转录和翻译水平抑制SMMC-7721细胞内c-myc、cdc25A、cdK2的表达.而且野生型XPD基因通过抑制cdK2的表达作用于S期DNA损伤检控点,从而抑制SMMC-7721细胞增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄神安	南昌大学第二附属医院消化内科	11	41	3.0	6.0
2	李军	南昌大学第二附属医院消化内科	40	121	7.0	9.0
3	熊瑛	南昌大学第二附属医院消化内科	8	70	4.0	8.0