重组腺相关病毒rAAV-NT4-ADNF-9转染大鼠耳蜗组织的体外研究

• 作者: 杨广笑 王全颖 祝康 许珉 郑国玺 韦俊荣
• 来源期刊: 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 重组腺相关病毒 活性依赖性神经营养因子9 耳蜗毛细胞 逆转录-聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 170-173
• 页数: 4页
• 分类号: R764.43
• 字数: 3478字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1781.2009.04.009

摘要

目的:包装携载神经营养素(NT4)与活性依赖性神经营养因子-9(ADNF-9)融合基因的重组腺相关病毒rAAV-NT4-ADNF-9,并观察该重组病毒对体外培养的耳蜗组织的转染.方法:使用pSSHG-CMV-NT4-ADNF-9、pFG140和pAAV/Ad三种质粒共转染293包装细胞,制备ADNF-9重组腺相关病毒(AAV),应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度;体外分离培养新生SD大鼠的耳蜗毛细胞;将重组病毒感染体外培养的新生SD大鼠耳蜗毛细胞,于24 h后提取组织行RT-PCR以检测rAAv-NT4-ADNF-9对耳蜗的转染.结果:应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度为2×1016 cfu/L,表明成功构建了重组AAV载体.成功分离培养新生SD大鼠的耳蜗毛细胞后,经RT-PCR反应,琼脂糖凝胶电泳检测结果显示NT4-ADNF-9在耳蜗组织中得到表达.结论:构建的重组病毒rAAV-NT4-ADNF-9在体外可成功转染耳蜗组织,用于基因治疗的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑国玺	西安交通大学医学院第二附属医院耳鼻咽喉科	55	265	9.0	14.0
2	祝康	西安交通大学医学院第二附属医院耳鼻咽喉科	36	69	5.0	6.0
3	韦俊荣	西安交通大学医学院第二附属医院耳鼻咽喉科	32	90	6.0	7.0
4	许珉	西安交通大学医学院第二附属医院耳鼻咽喉科	98	437	11.0	18.0
5	杨广笑	西安交通大学医学院第二附属医院耳鼻咽喉科	11	47	4.0	6.0
6	王全颖		62	151	5.0	8.0