重组腺相关病毒rAAV-NT4-ADNF-9的构建及其对体外培养的大鼠耳蜗组织的转染

• 作者: 杨广笑 王全颖 祝康 许珉 郑国玺 韦俊荣
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 重组腺相关病毒 活性依赖性神经营养因子-9 耳蜗毛细胞 反转录-聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 277-280,后插1
• 页数: 5页
• 分类号: R764|Q782
• 字数: 3558字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2008.04.001

摘要

目的:包装携载神经营养素(NT4)与活性依赖性神经营养因子-9(ADNF-9) 融合基因的重组腺相关病毒rAAV-NT4-ADNF-9,并观察该重组病毒对体外培养的耳蜗组织的转染.方法:使用pSSHG-CMV-NT4-ADNF-9,pGF140和pAAV/Ad 3种质粒共转染293包装细胞,制备ADNF-9重组腺相关病毒(recombinate adeno-associated virus, rAAV),应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度;体外分离培养新生SD大鼠的耳蜗毛细胞;将重组病毒感染体外培养的新生SD大鼠耳蜗毛细胞,于24 h后提取组织行反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)以检测rAAV-NT4-ADNF-9对耳蜗的转染.结果:应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度为2×1013 cfu/ml,表明成功地构建了重组AAV载体.成功分离培养新生SD大鼠的耳蜗毛细胞后,经RT-PCR反应,琼脂糖凝胶电泳检测结果显示NT4-ADNF-9在耳蜗组织得到了表达.结论:构建的重组病毒rAAV-NT4-ADNF-9,在体外可成功转染耳蜗组织,用于基因治疗的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑国玺	西安交通大学医学院第二附属医院耳鼻喉科	55	265	9.0	14.0
2	祝康	西安交通大学医学院第二附属医院耳鼻喉科	36	69	5.0	6.0
3	韦俊荣	西安交通大学医学院第二附属医院耳鼻喉科	32	90	6.0	7.0
4	许珉	西安交通大学医学院第二附属医院耳鼻喉科	98	437	11.0	18.0
5	王全颖		62	151	5.0	8.0
6	杨广笑		67	148	5.0	7.0