金荞麦二氢黄酮醇4-还原酶基因(FdDFR1)的克隆及序列分析

• 作者: 刘光德 李名扬 李艳冬 眭顺照 祝钦泷 郭铁英 钟光驰 雷兴华
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 金荞麦 二氢黄酮醇4-还原酶 克隆 类黄酮
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 55-63
• 页数: 9页
• 分类号: S5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.01.007

摘要

[目的]克隆金荞麦二氢黄酮醇4-还原酶基因(FdDFR1),分析其序列特征.[方法]利用同源克隆的原理,采用RACE结合cDNA文库筛选的方法,从金荞麦cDNA文库中克隆DFR基因(FdDFR1);对其序列进行生物信息学分析和Southern杂交检测.[结果]克隆到一个DFR蛋白基因(FdDFR1),通过Southern杂交分析,推测在金荞麦基因组中DFR基因是1～2个基因的小家族,FdDFR1是单拷贝基因;FdDFR1基因编码一个长341个氨基酸的蛋白质,在N端存在一个NADP结合位点"VTGASGFVGSWLVMRLLEHGY",还存在一个底物结合特异性决定的氨基酸基序"TVNVEBKQKPVYDETCWSDVDFCRRV".[结论]首次从金荞麦中克隆到类黄酮代谢的中期关键酶基因(FdDFR1),它具有DFR同源基因的典型特征.