大鼠胰高血糖素样肽-1受体的克隆和原核表达

• 作者: 刘洋 孟雁 杨红旺
• 来源期刊: 华中科技大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 胰高血糖素样肽-1受体 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 401-404
• 页数: 4页
• 分类号: R34
• 字数: 3604字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2009.03.032

摘要

目的 从大鼠胰岛细胞INS-1中克隆胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)的编码序列,构建原核表达载体并在大肠埃希菌中表达.方法 培养INS-1细胞.提取细胞总RNA,经RT-PCR技术扩增出GLP-1受体的编码序列.然后将其连接到原核表达载体pGEX-4T-1中,并进行酶切、测序鉴定.将获得的pGEX-4T-1-GLP-IR转化大肠埃希菌感受态细胞BL21(D3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后收集菌体蛋白,最后通过SDS-PAGE对收获的融合蛋白进行鉴定.结果 成功获得了GLP-1R编码序列,构建了原核表达载体pGEX-4T-1-GLP-1R并在大肠埃希菌BL21(D3)中表达.表达的融合蛋白主要存在于上清液中,分子量大小约为83 kD.结论 本实验为获取GLP-1R大量蛋白样品制备抗体提供了可能;GLP-1R的克隆也为建立2型糖尿病的新药筛选平台提供了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨红旺	中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理学系	3	39	2.0	3.0
2	刘洋	中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理学系	39	200	7.0	13.0
3	孟雁	中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生理学系	16	168	7.0	12.0