半套式RT-PCR法检测腹泻延边黄牛血液伤寒沙门氏菌试验

• 作者: 李佳佳 李杨 鞠玉琳
• 来源期刊: 湖北农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 半套式RT-PCR 延边黄牛 腹泻 血液 伤寒沙门氏菌
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 793-795
• 页数: 3页
• 分类号: Q503|S823.8+1|S852.61
• 字数: 2248字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0439-8114.2009.04.009

摘要

为建立一种快速、特异性和实用性强、灵敏度高的沙门氏菌检测方法,参考GeneBank中登录号为U25631的沙门氏菌基因序列.设计并合成引物,组成半套式RT-PCR,扩增片段为581bp.应用该半套式RT-PCR对标准菌株伤寒沙门氏菌、大肠杆菌、链球菌、巴氏杆菌和结核杆菌及临床伤寒分离出的沙门氏菌H1、H2株进行检测.并对延边地区牧场的产生-临床腹泻的延边黄牛血液中分离培养的不同菌株进行检测.结果表明,仪伤寒沙门氏菌标准株和临床一株样品在581bp处扩增出了特异的片段;该方法检测灵敏度为1 fg 核酸,且重复性好.说明此半套式RT-PCR法可以准确、灵敏、快速地检测出腹泻延边黄牛血液中的伤寒沙门氏菌.