嗜肺军团菌环介导等温扩增快速检测方法的建立与应用

• 作者: 占利 卢亦愚 张政 朱水荣 梅玲玲 王志刚
• 来源期刊: 中华流行病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 嗜肺军团菌 环介导等温扩增技术 建立与应用
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 实验室研究
• 页码范围: 481-485
• 页数: 5页
• 分类号: R5
• 字数: 4204字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-6450.2009.05.016

摘要

目的 建立一种适合基层检验部门及小型实验室使用的快速检测嗜肺军团菌的方法.方法 应用环介导等温扩增技术(LAMP),针对嗜肺军团菌mip基因设计5条引物(2条内引物、2条外引物及1条环引物),并对LAMP反应条件和反应体系进行优化.为验证该方法的特异性、敏感性,针对种系背景明确的12株嗜肺军团菌实验对照菌株、45株嗜肺军团菌地方分离株、6株非嗜肺军团菌、11株其他细菌以及59份外环境水样本进行检测,并将其结果与传统培养分离方法及定量PCR方法比较.结果 所检测的菌株样本中不同血清型嗜肺军团菌经LAMP检测均呈绿色为阳性,非嗜肺军团菌及其他菌株检测均呈橙色为阴性.实验结果表明,LAMP方法的检出率高于传统培养分离方法及定量PCR.应用该方法从菌株核酸的提取至检测完成仅需1.5 h左右,该体系检测灵敏度为5 cfu/ml,而且其检测结果在日(灯)光下通过肉眼即可判断.结论 实验建立的LAMP方法能够快速、灵敏、特异地检测嗜肺军团菌,适合基层检验部门及小型实验室与现场监测等使用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	占利	浙江省疾病预防控制中心微生物所	49	302	9.0	15.0
2	梅玲玲	浙江省疾病预防控制中心微生物所	83	735	14.0	25.0
3	王志刚	浙江省疾病预防控制中心微生物所	22	299	7.0	17.0
4	卢亦愚	浙江省疾病预防控制中心微生物所	127	1020	16.0	23.0
5	朱水荣	浙江省疾病预防控制中心微生物所	59	269	10.0	12.0
6	张政	浙江省疾病预防控制中心微生物所	65	309	10.0	13.0