用实时定量PCR和DGGE技术检测先天性巨结肠SIP1基因的表达与异质性

• 作者: 吕良英 张娟 王大佳 王维林 高红 黄英
• 来源期刊: 中华小儿外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 巨结肠 先天性 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2009,（12）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 840-844
• 页数: 5页
• 分类号: R72
• 字数: 3650字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2009.12.006

摘要

目的 建立简单、有效的SIP1基因在先天性巨结肠症(Hirschsprung disease,HD)中表达情况及异质性筛查技术,并获取其相应的散发性HD人群频率分布.方法 采用荧光实时定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR) 方法 检测180例HD及正常人外周血SIP1基因的mRNA 转录水平;采用PCR-DGGE(PCR degenerating gel gradient elactrophoresis, PCR-DGGE)法检测SIP1基因外显子1-rs11544569和外显子2-rs57148397的异质性.结果 SIP1基因在62.2%(112/180)的正常人和90.5%(163/180)的HD中阳性表达.HD患儿中SIP1基因在mRNA转录水平的表达均高于正常人外周血(P＜0.05). rs11544569和rs57148397两位点分别有104例和119例HD观察到异质性,其发生率为57.8%和66.1%.180例正常人中均未发现异常电泳条带.结论 检测SIP1 mRNA 含量可作为判断HD的良好参考指标.PCR-DGGE是一种简单、灵敏、高效的SIP1基因多态性及异质性检测技术,可应用于医学实践.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王维林	中国医科大学附属盛京医院卫生部小儿先天畸形重点实验室	138	536	11.0	14.0
2	张娟	中国医科大学附属盛京医院卫生部小儿先天畸形重点实验室	10	23	2.0	4.0
3	高红	中国医科大学附属盛京医院卫生部小儿先天畸形重点实验室	136	641	12.0	17.0
4	黄英	中国医科大学附属盛京医院卫生部小儿先天畸形重点实验室	49	217	8.0	11.0
5	王大佳	中国医科大学附属盛京医院卫生部小儿先天畸形重点实验室	35	84	5.0	6.0
6	吕良英	中国医科大学附属盛京医院卫生部小儿先天畸形重点实验室	11	18	3.0	3.0