猪繁殖与呼吸综合征病毒Hn-1/06株GP3蛋白的原核表达与纯化

• 作者: 刘明莉 刘玉松 夏平安 尹彦涛 崔保安 李伟娟 李素平 王中明 邱璜
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: PRRSV GP3蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 页码范围: 103-107
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4226字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中PRRSV美洲株ATCC VR2332的ORF3基因序列,利用Primer 5.0软件设计合成了1对特异性引物,经RT-PCR从河南分离株Hn-1/06株扩增得到了大小为765 bp的片段,并将扩增的片段插入pTG19-T载体进行测序而获得含有ORF3的阳性克隆pTG19-T-GP3.将此基因亚克隆到原核表达载体pET-32a,经筛选获得了阳性重组质粒pET-GP3,进而在IPTG的诱导下成功表达,获得了大小约为45 kDa的融合蛋白GP3-His,纯化后经Western blot检测证实表达的融合蛋白具有良好的生物学活性.从而为进一步研究PRRSV次要结构蛋白GP3的免疫特性和功能奠定了基础.