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摘要:
目的 构建抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloidfibroblast,KFB)Smad3基因表达的shRNA真核表达载体.研究Smad3 shRNA对KFB Smad7表达的影响.方法 用前期实验筛选出的1对最有效siRNA重组构建Smad3 shRNA表达质粒.通过脂质体介导的方法,将Smad3 shRNA转染到KFB,用RT-PCR及Western blot的方法检测Smad3、Smad7在不同时间点(0~9 d)表达的变化.结果 ①RT-PCR和Western blot的结果证实Smad3 shRNA载体构建成功.②转染Smad3 shRNA后,随着时间的延长,KFB中Smad3的mRNA与蛋白表达都显著减低,到72 h作用最强.光密度分析与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).Smad7的mRNA与蛋白表达都明显升高(P<0.05).结论 体外构建的shRNA-Smad3 RNAi真核表达载体能显著抑制KFB Smad3的表达.Smad3可能对Smad7起反向调节的作用.
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文献信息
篇名 shRNA抑制Smad3基因的表达对瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad7表达的影响
来源期刊 第三军医大学学报 学科 医学
关键词 瘢痕疙瘩 成纤维细胞 Smad3 Smad7 RNA干扰 shRNA
年,卷(期) 2009,(12) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 1172-1176
页数 5页 分类号 R394-33|R394.2|R619.6
字数 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1000-5404.2009.12.015
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 但洋 重庆医科大学附属第一医院整形烧伤外科 5 28 2.0 5.0
2 沈为民 重庆医科大学附属第一医院整形烧伤外科 46 166 7.0 10.0
3 果磊 重庆医科大学附属第一医院整形烧伤外科 54 277 10.0 14.0
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研究主题发展历程
节点文献
瘢痕疙瘩
成纤维细胞
Smad3
Smad7
RNA干扰
shRNA
研究起点
研究来源
研究分支
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
第三军医大学学报
半月刊
1000-5404
50-1126/R
大16开
重庆市沙坪坝区高滩岩30号
78-91
1979
chi
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