油菜基因BnWRI1的克隆及RNAi对种子含油量的影响

• 作者: 刘胜毅 张学江 柴国华 白泽涛 石磊 董彩华 蔡丽 郭学兰
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 油菜 含油量 WRI1基因 花粉管通道法 RNAi
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 1512-1518
• 页数: 7页
• 分类号: S3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.05.002

摘要

[目的]阐明油菜基因BnWRI1对其种子含油量的影响.[方法]采用RT-PCR技术从油菜中克隆到BnWRI1基因编码区内384 bp的片段,将该片段正反向插入干扰载体pGΩ4ARi中,构建成RNAi表达载体pGΩ4ARi-WRI1,通过花粉管通道法将其转入油菜受体品种中双9号中,[结果]获得3棵转基因植株,PCR扩增和基因组Southern杂交证实外源片段已整合在受体油菜基因组中.利用半定量RT-PCR和改进的索氏提取法分别检测转基因T1代植株的BnWR11基因表达量和种子含油量,结果表明:与非转基因对照相比,转基因植株的BnWRI1基因均受抑制,种子含油量有所降低.[结论]采用RNAi技术可使油菜内源基因BnWRI1沉默,表明油菜基因BnWRI1能有效调控种子含油量.