利玛原甲藻中聚酮合酶基因克隆与分析

• 作者: 刘洁生 李宏业 李挺 杨维东 汤敬谦
• 来源期刊: 生态学报
• 关键词: 利玛原甲藻 聚酮合酶 基因克隆 分子杂交
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 页码范围: 2383-2390
• 页数: 8页
• 分类号: Q178|Q945|Q781
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-0933.2009.05.024

摘要

为探讨聚酮合酶 (polyketide synthase, PKS)基因与藻毒素合成的关系,揭示PKS基因在赤潮毒素合成中的作用,采用兼并引物,通过PCR技术获得利玛原甲藻(Prorocentrum lima)可能存在的I型PKS基因;并对所获得PKS基因的同源性进行了分析,构建了基于PKS氨基酸序列的系统进化树;采用RT-PCR技术分析了PKS基因在利玛原甲藻中的表达状况;并通过多聚腺苷酸RNA的扩增、细菌的分离鉴定、限制性内切酶酶切、Southern blotting等技术对PKS基因进行了分析.结果表明,利玛原甲藻中PKS基因与海洋原甲藻聚为一支,在利玛原甲藻中有显著表达;以Oligo(T)引物进行RT-PCR扩增时,可出现18S rRNA和PKS基因相应条带;限制性内切酶酶切和Southern blotting结果显示,该基因中存在明显的甲基化;16S rRNA基因序列分析显示,从利玛原甲藻培养液中分离到的细菌与海洋放线菌假诺卡氏菌属(Pseudonocardia)基因序列同源性达到99%,该菌株中并不存在PKS基因.结果显示,所获得的PKS基因是利玛原甲藻聚酮合酶基因,基因序列已提交GenBank (EF521601);PKS可能在腹泻性贝毒合成中起着关键作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘洁生	暨南大学生物工程学系	96	1709	24.0	35.0
3	杨维东	暨南大学生物工程学系	94	1694	24.0	35.0
9	李宏业	暨南大学生物工程学系	19	149	7.0	11.0
10	汤敬谦	暨南大学生物工程学系	8	25	2.0	5.0
11	李挺		4	37	2.0	4.0