内皮抑素基因定点突变体的构建

• 作者: 付安安 刘平 尚巍 张春梅 张晶旭 殷秀丽 葛红岩
• 来源期刊: 国际眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 内皮抑素 定点诱变 角膜新生血管
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 实验论著
• 页码范围: 277-279
• 页数: 3页
• 分类号: R77
• 字数: 3039字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5123.2009.02.018

摘要

目的:内皮抑素是一种内源性的血管生成抑制剂.运用定点突变技术对人内皮抑素基因进行改造,将内皮抑素中的RGAD改为RGD序列.构建野生型和突变型RGD-endostatin基因的真核表达载体,为进一步探讨其对角膜新生血管的影响奠定基础.方法:以pMD18-T/endostatin载体为模板扩增野生型内皮抑素基因全长编码序列,克隆至真核表达载体pIRES2-EGFP上,采用快速体外定点诱变技术获得RGD突变体.经PCR,酶切和序列测定方法鉴定重组质粒.结果:PCR成功扩增了野生型和RGD突变型的内皮抑素基因,并成功构建了其真核表达载体.结论:改造的含有RGD结构的内皮抑素基因真核表达质粒的成功构建并鉴定.