病原微生物DNA的超快速提取方法建立与应用

• 作者: 王忠发
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 病原微生物 超快速提取 实时荧光PCR
• 年，卷（期）: 2009,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1979-1981
• 页数: 3页
• 分类号: Q75
• 语种: 中文

摘要

目的:为明显提高基于实时荧光定量PCR的微生物检测速度,应用于突发公共卫生事件发生时传染性疾病的早期诊断.方法:在煮沸裂解法的基础上对提取剂与提取时间进行改进与优化,并与优质柱式核酸提取试剂盒法、煮沸裂解法进行提取时间与提取效果比对.结果:超快速法可在5 min内完成病原菌DNA提取,煮沸裂解法与柱式核酸提取试剂盒法分别需要30 min和50 min.3种提取方法对不同病原体的提取效果通过对扩增曲线形态、灵敏度、重复性与ct值4项指标的比较均呈现高度一致性,ct值误差均<±1.5S、cv值均<3.9%,3种方法的ct值数据经F与t检验比较差异均不显著.结论:超快速法对病原微生物DNA的提取效果良好.提取速度明显快于柱式核酸提取试验盒法及煮沸裂解法,与实时荧光PCR配套可明显缩短检测所用时间,多次用于突发公共卫生事件应急检测取得良好效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王忠发		24	143	7.0	11.0