肺炎链球菌表面黏附素A的原核表达及免疫保护性研究

• 作者: 吴艳丽 孙文平 杨光 罗红
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺炎链球菌 PsaA 抗原性 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（21）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3216-3219
• 页数: 4页
• 分类号: R-332|R392
• 字数: 2783字
• 语种: 中文

摘要

目的 利用基因工程技术获取原核表达的肺炎链球菌表面黏附素A(Psa A)蛋白并初步研究其对小鼠的免疫保护性.方法 根据基因库中psa基因序列设计合成特异性引物,从临床分离到的肺炎链球菌中提取DNA,PCR技术扩增目的 基因psaA,克隆后构建原核表达栽体PET-32a(+)/psaA,将重组质粒转化到大肠杆茵BL21(DE3)中,以IPTG诱导表达,获得重组蛋白,并通过Western-blot鉴定其免疫活性.将重组蛋白免疫小鼠,观察对肺炎链球茵感染动物的保护作用.结果 经酶切及测序鉴定,克隆出870bp的目的 基因,DNA序列与Gen-Bank中的相应数据符合率为100%;成功构建出原核表达载体pET-32a/psaA;经IPTG诱导,表达出了约57 kD左右的融合蛋白,与预期大小相符,并且具有抗体结合活性;重组PsaA蛋白对肺炎链球菌感染小鼠具有一定保护作用.结论 在原核细胞中成功表达出PsaA蛋白,能在一定程度上抵抗肺炎链球菌感染,为基于黏附素的新型疫苗的研究提供线索.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨光	大连医科大学临床免疫与微生物教研室	131	933	14.0	26.0
2	罗红	大连医科大学临床免疫与微生物教研室	41	207	8.0	13.0
3	吴艳丽	大连医科大学临床免疫与微生物教研室	2	2	1.0	1.0
4	孙文平	大连医科大学临床免疫与微生物教研室	48	392	10.0	18.0