体质量对大鼠胰岛分离纯化产量的影响

• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 体质量 大鼠 胰岛 产量
• 年，卷（期）: 2009,（44）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 8685-8689
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 5092字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.44.018

摘要

背景:由于实验条件对胰岛的产量影响较大,因此需要在动物种属、动物周龄、体质量以及胶原酶的浓度、胰腺消化时间等方面进行优化组合,筛选出最佳条件,以期得到高产量的胰岛.目的:观察体质量因素对大鼠胰岛分离纯化产量的影响,筛选出获取高产量胰岛素的最佳体质量.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-01/12在上海市东方医院细胞治疗室及中心实验室等相关单位完成.材料:60只雄性SD大鼠按照体质量随机分为100～150 g组、150～200 g组、200～250 g组、250～300 g组、300 g以上组,每组12只.方法:通过胆总管灌注胶原酶V来消化大鼠胰腺,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛.主要观察指标:以双硫腙染色鉴定胰岛,丫啶橙/碘丙啶染色鉴定胰岛细胞活率,根据胰岛直径计数所获胰岛的数量及胰岛当量,葡萄糖刺激胰岛素释放试验评估胰岛功能.结果:分离的大鼠胰岛具有较好的质量,胰岛纯度为95%左右,活率为90%左右,体外培养中生长良好.随着体质量增加,胰岛数量和胰岛当量明显增加(P＜0.05),具有明显的相关性(r=0.918,r=0.922,P＜0.01),并且最大直径的胰岛数量也在增加(P＜0.05),以300 g以上组所获得的胰岛数量及胰岛当量最多(P＜0.05).在低糖和高糖刺激下胰岛素释放分别为(62.33±9.67)mU/L和(125.5±22.04)mU/L,差异具有显著性意义(P＜0.05),刺激指数为2.01±0.21,提示胰岛细胞功能良好.结论:大鼠体质量是获得高产量胰岛的关键性因素之一,在其他条件不变的情况下,体质量高的大鼠所获得的胰岛产量较高.实验选择300 g以上的大鼠进行胰岛分离纯化可获得稳定的高产量胰岛.