胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响

• 作者: 向广阳 王业增 蒋小峰 钱世鹍 钱滔来 陈德 陈松伟 高玲
• 来源期刊: 临床医学工程
• 学科: 医学
• 关键词: 胶原酶浓度 大鼠 胰岛 产量
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 492-494
• 分类号: R657.5
• 字数: 3173字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4659.2011.04.0492

摘要

目的 观察胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响,筛选出获取高产量胰岛的最佳消化液的胶原酶浓度.方法 75只雄性SD大鼠按胶原酶浓度分为5组:Ⅰ组(0.5 mg/ml)、Ⅱ组(0.75 mg/ml)、Ⅲ组(1.0 mg/ml)Ⅳ组(1.2 mg/ml)和Ⅴ组(1.5 mg/ml),每组15只.通过胆灌注胶原酶V来消化大鼠胰腺,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,根据胰岛直径计数所获胰岛的数量及胰岛当量,并利用葡萄糖刺激胰岛素释放试验评估胰岛功能.结果 分离的大鼠胰岛具有较好的质量,胰岛纯度为95%左右,活性率为90%左右,体外培养生长良好.随着胶原酶的浓度增加,胰岛数量和胰岛当量明显增加(P<0.05),并且最大直径的胰岛数量也在增加(P<0.05),在胶原酶浓度1.0 mg/ml时获得的胰岛产量最高,其次为1.2 mg/ml,在其他浓度时,胰岛产量都较低(P<0.05).在低糖和高糖刺激下胰岛素的释放分别为(1.346±0.128)ng/ml和(2.565±0.208)ng/ml,差异具有显著性意义(P<0.05),刺激指数为(1.908±0.152),提示胰岛细胞功能良好,电镜照片显示胰岛生长状况良好.结论 进行大鼠胰岛分离纯化时最适宜的胶原酶浓度为1.0～1.2 mg/ml,可获得稳定高产量的胰岛,过低和过高的浓度都是不适宜的.