脂质体转染质粒DNA成功导入小鼠受精卵

• 作者: 于秉治 刘莹 宋阳 崔城 朱亚勤 李亘松 赵宇 邓欣
• 来源期刊: 解剖科学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 转染 小鼠 受精卵 透明带 pAkt(Ser473)
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 514-518,522
• 分类号: Q782|Q813
• 字数: 4612字
• 语种: 中文

摘要

目的 研究脂质体转染方法将质粒DNA导入小鼠受精卵中的可行性.方法 用免疫细胞化学方法在受精卵内检测pAkt(Ser473)蛋白的分布.用脂质体转染的方法将质粒FLAG-PIPP或FLAG vector导入受精卵,再用Western Blot检测两组卵细胞中pAkt(Ser473)的表达量.用荧光显微镜检测GFP-PH/ARNO质粒在卵细胞中的表达同时观察胰岛素对其影响.结果 pAkt(Ser473)抗体成功穿过透明带表达在受精卵内,细胞膜表达最强.与FLAG vector转染的受精卵相比,pAkt(Ser473)在转染FLAG-PIPP质粒的受精卵内表达量明显减少.与PIP3结合的GFP-PH/ARNO绿色荧光以细胞核表达为主,并且胰岛素可以使荧光增强.结论 脂质体转染方法可成功地将质粒DNA穿过透明带导入小鼠受精卵内.