稳定转染HMGA1基因的小分子干扰RNA对卵巢上皮性癌细胞生物学特性的影响

• 作者: 柳英兰 郑建华
• 来源期刊: 中华妇产科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢肿瘤 RNA 小分子干扰 HMGA蛋白质类 转染
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 51-55
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 5263字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2010.01.014

摘要

目的 观察稳定转染HMGA1基因的小分子干扰RNA(siRNA)对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞生物学特性的影响.方法 实验分为3组,反义序列载体(卵巢癌细胞系OVCAR细胞转染载有HMGA1基因siRNA序列的pSilence4.1-CMV-Hs质粒)、无关序列载体(OVCAR细胞转染载有HGMA1基因无关序列的pSilence4.1-CMV-Hn质粒)和空白对照组(OVCAR细胞仅转染脂质体),3组均经抗性筛选获得稳定转染的细胞系.采用RT-PCR技术、蛋白印迹法检测3组细胞中HMGA1mRNA和蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝比色法观察细胞增殖情况,绘制细胞生长曲线;体外侵袭实验观察3组细胞转染前后侵袭能力的变化;裸鼠接种3组细胞后观察其成瘤能力的变化.结果 (1)反义序列载体组转染前、后OVCAR细胞中HMGA1 mRNA表达水平分别为(86.3±2.7)%和(35.8±3.1)%,HMGA1蛋白表达水平分别为(68.6±2.8)%和(22.3±4.2)%,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);无关序列载体组和空白对照组转染前、后HMGA1 mRNA和蛋白表达水平分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(2)反义序列载体组OVCAR细胞增殖速度明显慢于无关序列载体组和空白对照组(P<0.05).(3)转染前、后的穿膜细胞数,反义序列载体组分别为(53±6)和(21±6)个,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05);无关序列载体组和空白对照组转染前、后的穿膜细胞数分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(4)接种转染后的OVCAR细胞后,反义序列载体组裸鼠的成瘤时间为(6.0±0.9)d,明显短于无关序列载体组的(12.3±3.9)d和空白对照组的(13.0±2.3)d(P<0.05).接种5周后,反义序列载体组裸鼠的肿瘤重量和体积分别为(0.8±0.3)g和(205±34)mm~3,分别与无关序列载体组[分别为(2.1±0.4)g和(987±82)mm~3]和空白对照组[分别为(2.3±0.3)g和(956±79)mm~3]比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 HMGA1 siRNA可显著降低卵巢癌细胞中HMGA1基因的表达,并对卵巢癌细胞的生长有抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	柳英兰	哈尔滨医科大学附属第一医院妇产科	25	220	7.0	14.0
2	郑建华	哈尔滨医科大学附属第一医院妇产科	99	832	14.0	25.0