造血干细胞移植后淋巴细胞增殖症患者单个核细胞来源DC负载EBV抗原肽制备DC-CIK

• 作者: 张改玲 朱平 潘崚 牛志云 蔡圣鑫 达万明 郭晓玲 魏雅
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 树突状细胞 CIK细胞 EB病毒 移植后淋巴细胞增殖症 过继性细胞免疫治疗
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 285-291
• 分类号: R730.51
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2010.03.008

摘要

目的:以造血干细胞移植后并发淋巴细胞增殖症(post-transplant lympholiferative disorder,PTLD)患者外周血单核细胞培养诱导DC,负载抗原肽后制备DC-CIK(cytokine-induced killer cell),为探索新的PTLD治疗方法奠定基础.方法:分离造血干细胞移植后EBV(Epstein-Barr virus)感染致PLTD患者外周血单个核细胞,贴壁细胞培养诱导DC,悬浮细胞诱导CIK;负载EBV抗原肽LMP2后建立DC-CIK共培养体系.流式细胞仪分析共培养前后细胞的免疫表型,ELISA检测共培养前后细胞上清IFN-γ的分泌水平,基因扫描仪分析T细胞受体(T cell receptor,TCR)β家族基因谱.结果:成功制备负载EBV抗原肽的DC-CIK,HLA-DR+CD86+DC细胞从诱导前的12.5%增加到91.17%;DC-CIK共培养14 d后,两例患者的CIK数量分别增加了5.3和6.8倍;CD3+、CD8+、CD3+CD8+以及CD3+CD56+细胞比例在DC-CIK共培养后均明显升高(均P＜0.05).抗原肽负载的DC-CIK共培养体系中IFN-γ的分泌水平明显高于未经抗原肽负载的DC组[(1 332.6±92.38)pg/mlvs(693.42±62.41)pg/ml,P＜0.01)].DC-CIK培养后细胞的TCRβ家族基因在5.2家族出现单克隆表达峰.结论:EBV抗原肽负载后DC可诱导DC-CIK共培养体系中CD3+CD8+以及CD3+CD56+细胞扩增,并分泌高水平IFN-γ,为临床应用DCCIK对移植后EBV感染致PTLD患者进行过继性细胞免疫治疗提供实验基础.