耶氏酵母菌POX5基因的敲除

• 作者: 刘常金 师慧敏 张治洲 王芳 黄琳
• 来源期刊: 现代食品科技
• 学科: 工学
• 关键词: 耶氏酵母 POX5基因 基因敲除 Cre/loxP系统 γ-癸内酯
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 331-336
• 分类号: TS2
• 字数: 3358字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-9078.2010.04.001

摘要

对于耶氏酵母(Yarrowia lipolyaca)中编码与γ-癸内酯合成相关的乙酰辅酶A氧化酶基因(POX1-POX5)中的POX5基因用Cre/loxP同源重组系统进行敲除.设计含有60个核苷酸与POX5基因的ORF两侧序列同源的长引物,以pUG6为模板构建带有Cre/loxP系统的敲除组件,之后转化耶氏酵母YL(Yarrowia lipotytica),通过PCR确定阳性克隆子.将质粒pSH65转入阳性克隆子,半乳糖诱导表达Cre酶以切除KanMX基因并经过PCR确认.最后在YPD培养基中连续传代培养丢失pSH65质粒,成功获得POX5缺陷型菌株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘常金	天津科技大学食品工程与生物技术学院	49	283	10.0	14.0
2	王芳	天津科技大学食品工程与生物技术学院	55	211	9.0	11.0
3	黄琳	天津科技大学食品工程与生物技术学院	3	6	2.0	2.0
4	师慧敏	天津科技大学食品工程与生物技术学院	3	15	3.0	3.0