解脂酵母中POX3基因的敲除研究

• 作者: 刘常金 师慧敏 张治洲 王芳 黄琳
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 生物学
• 关键词: 耶氏酵母 POX3基因 基因敲除 Cre/loxP系统 γ-癸内酯
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 232-234,238
• 分类号: Q789
• 语种: 中文

摘要

对耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)中编码与γ-癸内酯合成相关的乙酰辅酶A氧化酶基因(POX1-POX5)中的POX3基因用Cre/loxP同源重组系统进行敲除.设计含有60个核苷酸与POX3基因的ORF两侧序列同源的长引物,以pUG6为模板构建带有loxP-KanMX-loxP系统的敲除组件,之后转化耶氏酵母,通过PCR确定阳性克隆子.将质粒pSH65转入阳性克隆子,半乳糖诱导表达Cre酶以切除KanMX基因.最后在YPD培养基中传代丢失pSH65质粒,获得POX3缺陷型菌株.由于在解脂酵母中表达生产γ-癸内酯直接牵扯到若干个需要抑制的基因,单独缺失其中的一个基因理论上可能实现不了产量的极大值.本研究为进一步构建组合敲除准备了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘常金	天津科技大学食品工程与生物技术学院	49	283	10.0	14.0
2	王芳	天津科技大学食品工程与生物技术学院	55	211	9.0	11.0
3	黄琳	天津科技大学食品工程与生物技术学院	3	6	2.0	2.0
4	师慧敏	天津科技大学食品工程与生物技术学院	3	15	3.0	3.0