酿酒酵母ADH3基因的敲除

• 作者: 宋浩雷 杨月梅 江贤章 郭晓贤 黄建忠
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 工学
• 关键词: 酿酒酵母 乙醇脱氢酶 ADH3 基因敲除 PCR
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 28-32
• 页数: 5页
• 分类号: TS2
• 字数: 3209字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2006.04.006

摘要

设计含有与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)编码乙醇脱氢酶Ⅲ的ADH3基因ORF两侧序列同源的长引物,以质粒pUG6为模板进行PCR构建带有Cre/loxP系统的敲除组件.转化酿酒酵母YS3(Saccharomyces cerevisiae),并将质粒pSH65转入阳性克隆子.半乳糖诱导表达Cre酶切除Kanr基因,在YPD培养基中连续传代培养丢失pSH65质粒,在原ORF处留下一个loxP位点,获得ADH3单倍体缺陷型菌株.利用同样的方法再次敲除双倍体的另一个等位基因.最终获得ADH3双倍体基因缺陷型突变株YS3-ADH3.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄建忠		125	695	15.0	20.0
2	江贤章		49	343	12.0	16.0
3	宋浩雷		3	34	2.0	3.0
4	郭晓贤		4	49	3.0	4.0
5	杨月梅		4	69	3.0	4.0