引物延伸/变性高效液相色谱检测HBV拉米夫定耐药突变

• 作者: 张建英 毛雄英 沈广宇 王卫华 陈辉
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 变性高效液相色谱 引物延伸 突变检测 拉米夫定耐药
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 172-174
• 页数: 3页
• 分类号: R373.2+1
• 语种: 中文

摘要

目的 建立引物延伸/变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测HBV拉米夫定耐药突变的方法.方法 本法只需单条引物一次延伸反应便可检测野生株YMDD型、突变株YIDD和YVDD型.其中,突变株YVDD型被延伸1个碱基(G),突变株YIDD型被延伸4个碱基(ATTG/ATCG),野生株YMDD型被延伸3个碱基(ATG),延伸产物用DHPLC检测长度;构建野生株YMDD型、突变株YIDD型和YVDD型质粒,对方法进行检验;用商品试剂和临床标本对方法进行验证.结果 野生株YMDD型、突变株YIDD型和YVDD型克隆质粒验证结果完全符合;临床56例标本的检测结果与商品化试剂(熔解曲线法)结果完全符合.结论 引物延伸/DHPLC检测HBV基因拉米夫定耐药突变是一个高特异性、高可靠性的方法.