禽鹦鹉热嗜性衣原体PmpD基因N端区的克隆与表达

• 作者: 何诚 凌勇 张发明 李应超 杨君敬 蒋毅 袁吉磊 陈曦
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: PmpD基因 N端区 克隆 表达 重组蛋白 鹦鹉热嗜性衣原体
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 农业科学
• 页码范围: 62-66
• 分类号: S852.67
• 语种: 中文

摘要

为探讨禽鹦鹉热嗜性衣原体PmpD基因的生物学功能,本实验根据禽类鹦鹉热嗜性衣原体Cal-10株全基因序列设计引物,用PCR法扩增禽嗜性衣原体PmpD基因N端区,将特异性目的基因片段克隆入PBS-TⅡ栽体,经测序后确认为目的基因,并提交GenBank.试验扩增的禽鹦鹉热嗜性衣原体Cal株PmpD基因与禽鹦鹉热衣原体6BC株的PmpD基因和氨基酸序列的相似性均达99%,与流产衣原体成员嗜流产衣原体S26/3株、嗜豚鼠衣原体(GPIC)、嗜猫衣原体(Fe/C-56)核苷酸相似性分别为89%、82%和77%.PmpD基因N端区基因亚克隆到pET-32a(+)载体上,重组表达栽体转化BL21(DE3)表达宿主菌,以IPTG诱导该重组菌,结果表达了约63 ku大小的融合蛋白;分别用禽鹦鹉热嗜性衣原体多克隆抗体、猪、羊流产嗜性衣原体多克隆抗体与表达出的重组蛋白进行Western blotting检测,结果表明该蛋白与禽源衣原体多克隆抗体呈阳性反应,与猪、羊源衣原体多克隆抗体呈阴性反应,显示该重组蛋白具有种属特异性.本研究首次表达了禽类鹦鹉热嗜性衣原体PmpD基因的N端区的重组蛋白,为进一步研究其生物学功能提供依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何诚	中国农业大学动物医学院	73	386	9.0	14.0
2	陈曦	中国农业大学动物医学院	20	63	4.0	7.0
3	袁吉磊	中国农业大学动物医学院	6	11	2.0	3.0
4	杨君敬	中国农业大学动物医学院	8	31	4.0	5.0
5	凌勇	中国农业大学动物医学院	5	10	2.0	3.0
6	蒋毅	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	9	28	3.0	5.0
7	张发明	中国农业大学动物医学院	3	55	2.0	3.0
8	李应超	中国农业大学动物医学院	2	5	1.0	2.0