禽源鹦鹉热衣原体MOMP基因重组腺病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 周继章 张小英 曹小安 邱昌庆
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鹦鹉热衣原体 MOMP基因 腺病毒载体 表达
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 微生物学
• 页码范围: 13-17
• 页数: 5页
• 分类号: S852.67|Q786
• 字数: 4248字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2006.01.005

摘要

对从疑似禽衣原体病鸡分离鉴定的鹦鹉热衣原体用PCR方法扩增,获得了完整的外膜主蛋白(MOMP)基因,将其克隆到pMD 18-T Simple载体中,用BglⅡ和SalⅠ双酶切出目的基因,并将其与已线性化的pshuttle-CMV穿梭载体连接.然后,将阳性质粒转化入含有腺病毒骨架载体的BJ5183感受态细胞中进行同源重组.将同源重组的腺病毒粒子转入DH5α大肠埃希氏菌增殖.提取同源重组后的腺病毒粒子转染AD-293细胞,待重组腺病毒在AD-293细胞中传代稳定后,经PCR技术检测,扩增到了MOMP目的基因; 用间接免疫荧光试验检测,呈阳性反应,证明目的蛋白得到了表达.经测定,重组腺病毒的效价达3.9×1010 PFU/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周继章	中国农业科学院兰州兽医研究所	28	198	8.0	13.0
2	邱昌庆	中国农业科学院兰州兽医研究所	41	326	10.0	16.0
3	曹小安	中国农业科学院兰州兽医研究所	22	104	5.0	10.0