基于CMV启动子表达鹦鹉热衣原体PmpD-N蛋白的重组火鸡疱疹病毒的构建

• 作者: 何诚 刘杉杉 孙伟 张稳 沈易华 罗杰 贾长青 郁建生
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 鹦鹉热衣原体 多型外膜蛋白D的N端 火鸡疱疹病毒 细菌人工染色体技术 巨细胞病毒启动子
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 13-18
• 页数: 6页
• 分类号: S852.67|Q789
• 字数: 4669字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2018.07.003

摘要

为构建表达鹦鹉热衣原体多型外膜蛋白 D的 N端(PmpD-N)蛋白重组火鸡疱疹病毒(HVT),以鹦鹉热衣原体CB7 株DNA为模板,通过PCR扩增pmpD-N基因,构建带有巨细胞病毒(CMV)启动子的真核表达盒,采用细菌人工染色体技术构建 HVT重组子,转染细胞获得 HVT重组病毒,并在体外评价该重组病毒的相关特性.结果表明,转染细胞后成功获得 HVT重组病毒.通过 Western blot和 IFA分析表明,重组病毒表达了 PmpD-N 蛋白.Confocal 分析表明,PmpD-N 蛋白分布在细胞的胞核、胞浆和细胞表面. HVT重组病毒的复制特性和野生型 HVT一致. HVT重组病毒能够激活巨噬细胞促炎性细胞因子IL-6 和NO的产生.该试验成功构建了含有CMV启动子,能够表达PmpD-N蛋白的 HVT重组病毒,为下一步进行动物试验和分析该病毒的免疫效力奠定了基础.