牛型布氏杆菌GroEL的克隆表达及其生物学特性研究

• 作者: 丁铲 于圣青 何随彬 胡青海 韩先干
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 布氏杆菌 GroEL 表达 酶活检测
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 27-31
• 分类号: S852.614
• 字数: 3168字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2010.05.006

摘要

根据已发表的牛型布氏杆菌(Brucella abrotus)基因序列设计一对特异性引物,以B. abrotus A19株基因组为模板,通过PCR扩增GroEL基因,经T-A克隆后进行序列测定和分析.结果表明,GroEL基因全长1 641bp,编码546个氨基酸.将GroEL定向克隆至表达载体pET32a中,构建重组表达质粒pET32a-LGroEL,然后转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下成功获得重组表达蛋白His-GroEL,大小为81kDa.经Western blot检测,牛布氏杆菌阳性血清中有GroEL抗体存在,表明该蛋白具有免疫原性.对重组表达蛋白His-GroEL进行酶促活性检测,结果表明该蛋白在体外具有催化ATP水解的酶活性和促进乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)复性的功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩先干	中国农业科学院上海兽医研究所	31	220	9.0	14.0
2	何随彬	南京农业大学动物医学院	5	17	3.0	4.0
3	胡青海	中国农业科学院上海兽医研究所	15	115	5.0	10.0
4	丁铲	中国农业科学院上海兽医研究所	95	454	11.0	16.0
5	于圣青	中国农业科学院上海兽医研究所	53	286	9.0	14.0