半夏凝集素基因克隆及其对桃蚜的抗性研究

• 作者: 党志红 吴志明 温春秀 潘文亮 董文琦 谢晓亮 陈劲枫
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 半夏凝集素 基因克隆 转基因烟草 抗性 桃蚜
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 页码范围: 45-50
• 分类号: S634.3
• 字数: 4381字
• 语种: 中文

摘要

研究了半夏凝集素(Pinellia terrtata agglutinin,PTA)基因对桃蚜(Myzus persicae)的抗性.从半夏幼叶中提取总RNA,采用RT-PCR法分离克隆出PTA-1基因cDNA片段,该基因在GenBank中登录号为DQ092435.序列分析表明:该cDNA片段全长为810 bp,编码269个氨基酸组成的蛋白,具有单子叶植物甘露糖凝集素基因家族的特征,含有3个由4个氨基酸(QDNY)组成的甘露糖专一结合位点,与报道的天南星科凝集素基因氨基酸序列的同源性在72.7%～92.9%.构建了35S启动子控制下的PTA 1基因的植物表达载体pBI121-PTA 1,该载体含有抗卡那霉素的选择标记基因(not Ⅱ),利用根癌农杆菌介导法转化烟草获得抗卡那霉素的植株.PCR和半定量RT-PCR分析表明:PTA 1基因已经整合到植物基因组中并在转录水平上得到了有效表达.抗蚜虫鉴定表明:转基因植株有效地抑制了蚜虫的群体增长率,平均抑制率达77.02%,表明该基因对同翅目害虫的抗虫基因工程有重要的应用价值.