表达血管内皮生长因子-siRNA及双自杀基因yCDglyTK的联合基因载体构建及其应用研究

• 作者: 冷爱民 刘霆 叶玲 张桂英 彭杰 易红 肖志强 陈选民
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 自杀基因 胃癌 联合基因治疗
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 503-509
• 页数: 7页
• 分类号: R57
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1206.2009.00598

摘要

构建了新型联合基因载体pcDNA3.1(-)VEGF-siRNA/yCDglyTK,研究其在人胃癌细胞系SGC7901细胞中的表达和杀伤作用.构建靶向血管内皮生长因子(VEGF)的干扰质粒pGenesil-VEGF-siRNA,采用PCR法从中扩增siRNA表达框(含U6启动子),亚克隆至双自杀基因载体pcDNA3.1(-)CV-yCDglyTK,构建联合基因质粒pcDNA3.1(-)VEGF-siRNA/yCDglyTK;通过酶切、测序等鉴定重组质粒;以磷酸钙纳米颗粒为载体,将干扰质粒、双自杀基因质粒及联合基因质粒转染SGC7901细胞,RT-PCR、Western-blot验证目的基因表达;MTT法检测转染细胞对5-氟胞嘧啶(5-FC)的敏感性.结果表明:酶切及测序证实联合基因载体pcDNA3.1(-)VEGF-siRHA/yCDglyTK构建成功;SGC7901细胞转染联合基因质粒后,RT-PCR、Western-blot证实融合自杀基因表达,而VEGF基因表达下调;在前体药物5-FC作用下,转染联合基因组细胞存活率最低,与其他组比较有统计学差异.成功构建联合基因载体pcDNA3.1(-)VEGF-siRNA/yCDglyTK,初步验证靶向VEGF的RNA干扰与双自杀基因系统具有协同效应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖志强	中南大学湘雅医院/中南大学第一临床学院	80	475	12.0	16.0
2	张桂英	中南大学湘雅医院/中南大学第一临床学院	215	1229	17.0	23.0
3	易红	中南大学湘雅医院/中南大学第一临床学院	38	283	10.0	15.0
4	刘霆	中南大学湘雅医院/中南大学第一临床学院	34	212	7.0	14.0
5	叶玲	中南大学湘雅医院/中南大学第一临床学院	6	46	3.0	6.0
6	彭杰	中南大学湘雅医院/中南大学第一临床学院	40	152	8.0	9.0
7	冷爱民	中南大学湘雅医院/中南大学第一临床学院	31	107	6.0	9.0
8	陈选民	中南大学湘雅医院/中南大学第一临床学院	4	6	1.0	2.0