人端粒酶催化亚单位(hTERT)反义分子探针的制备与理化性质初步研究

• 作者: 刘萌 张春丽 王荣福 闫平
• 来源期刊: 核化学与放射化学
• 学科: 医学
• 关键词: 人端粒酶催化亚单位(hTERT) S-Acetyl NHS-MAG3 99Tcm 分子探针 反义显像
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 35-40
• 分类号: R817
• 字数: 3667字
• 语种: 中文

摘要

制备放射性核素99Tcm标记的针对人端粒酶催化亚单位(human telomerase reverse transcriptase, hTERT)mRNA的反义分子探针,探讨其在体外的稳定性和相关理化性质.针对hTERT mRNA(GENBANK号为AF015950)的第2331～2348位核苷酸(含18个碱基),即5′-TCAAGAGCCACGTCTCTA-3′(hTERT SON),设计反义寡核苷酸序列(hTERT ASON)为5′-TAGAGACGTGGCTCTTGA-3′;对hTERT ASON进行适当修饰.通过双功能螯合剂S-Acetyl NHS-MAG3进行放射性核素99Tcm标记.针对影响标记的主要因素(SnCl2用量、反应体积、反应时间等)进行条件摸索,建立最优化标记方案.纸层析法测定反义分子探针(99Tcm-hTERT ASON)的标记率和放射化学纯度,计算比活度.检测99Tcm-hTERT ASON的放射稳定性与序列稳定性,以及血清蛋白结合率.所有结果通过统计学软件SPSS12.0进行分析.室温下反应15～30min后,99Tcm-hTERT ASON的标记率为76%±5%(n=5);在相同条件下,无双功能螯合剂作用,ASON的标记率仅为5.0%±1.6%(n=5);二者比较有显著差异(P<0.05).99Tcm-hTERT ASON放射化学纯度达到96%以上,比活度为1850GBq/g.在不同条件下,99Tcm-hTERT ASON的放射化学纯度在24h内均达到93%以上.PAGE凝胶电泳显示99Tcm-hTERT ASON在与人新鲜血清37℃孵育6h内未发生任何降解.与人新鲜血清37 ℃孵育1、3和6h后,99Tcm-hTERT ASON的血清蛋白结合率分别为15.0%±1.6%、18.0%±1.9%和20.0%±2.4%.99Tcm-hTERT ASON具有较高标记率、放射化学纯度和比活度;其放射稳定性和序列稳定性均良好,与血清蛋白结合率较低,适合作为反义显像剂用于进一步研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王荣福	北京大学第一医院核医学科	335	2214	20.0	27.0
2	张春丽	北京大学第一医院核医学科	141	1300	17.0	30.0
3	刘萌	北京大学第一医院核医学科	50	250	8.0	13.0
4	闫平	北京大学第一医院核医学科	41	159	6.0	9.0