抗菌肽LL-37在毕赤酵母SMD1168中的高效表达及活性鉴定

• 作者: 何俊 刘德辉 林云熊 黄毓茂
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 抗菌肽LL-37 基因设计 高效表达 活性鉴定
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 98-101,120
• 页数: 5页
• 分类号: S852.5
• 字数: 3677字
• 语种: 中文

摘要

为获得高效表达的抗菌肽LL-37,根据人源抗菌肽LL-37的氨基酸序列,选择毕赤酵母(Pichiapastoris)密码子的偏嗜性,通过SOEing法改造合成LL-37基因片段,克隆到pGAPZαA质粒中,获得分泌型重组酵母表达载体pGAPZαA-LL37.pGAPZαA-LL-37通过限制性内切酶AvrⅡ酶切线性化后,经电穿孔法转入毕赤酵母细胞SMD1168.经Zeocin抗性筛选,得到高拷贝转化子,PCR检测表明LL-37基因与毕赤酵母染色体稳定结合.在GAP启动子调控下,LL-37蛋白获得分泌表达,其上清表达量约为237 mg/L.表达产物耐热性强,在100℃条件下30 min内仍保持一定的抗菌活性.表达产物对大肠杆菌DH5 α、大肠杆菌D31和猪链球菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为1.56μg/mL、3.12μg/mL和6.25μg/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄毓茂	华南农业大学兽医学院	72	520	12.0	20.0
2	刘德辉	华南农业大学兽医学院	15	121	7.0	11.0
3	何俊	华南农业大学兽医学院	5	30	2.0	5.0
4	林云熊	华南农业大学兽医学院	1	19	1.0	1.0