嗜肺军团菌环介导等温扩增检测法的建立

• 作者: 吕沁风 吴忠华 李禾 沈建根 罗鹏 郑伟
• 来源期刊: 浙江大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 军团病杆菌,嗜肺 军团杆菌病/诊断 基因扩增 聚合酶链反应/方法 增强子元件(遗传学)
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 305-310
• 分类号: R378.99
• 字数: 3835字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2010.03.015

摘要

目的:建立一种快速简便的嗜肺军团菌分子检测方法.方法:运用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),设计一套引物特异性识别嗜肺军团菌毒力基因--mip基因的6个特殊区域,在恒温条件下,对8株嗜肺军团菌和5株其它细菌进行检测,并与普通PCR方法进行比对,验证该方法的特异性和灵敏度.结果:所有嗜肺军团菌扩增产物均产生肉眼可见的白色沉淀,而其它不同菌株均不产生沉淀;加入荧光染料smart green后,嗜肺军团菌扩增产物均产生强绿色荧光,其它菌株呈弱荧光.与普通PCR(检出限约为57.6 pg,)比,LAMP扩增反应的灵敏度大100倍左右,基因组DNA检出限为576 fg,阳性水样检出限为8 cfu/ml.结论:LAMP技术可在简易的实验环境中快速、特异、灵敏地检测嗜肺军团菌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈建根	浙江大学医学院	30	178	8.0	12.0
2	吴忠华		24	43	4.0	5.0
3	罗鹏		16	33	4.0	5.0
4	吕沁风	浙江大学医学院	23	81	4.0	8.0
6	郑伟		19	34	4.0	5.0
7	李禾		14	34	4.0	5.0