松毛虫mtDNA PCR反应体系优化

• 作者: 吴丽欣 张学卫 高宝嘉
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 松毛虫 PCR反应体系 正交设计 优化
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 77-80
• 分类号: S763.42+1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1573.2010.04.016

摘要

为了应用线粒体DNA研究松毛虫种群的遗传结构,本研究采用正交试验设计法L16(45)对影响松毛虫mtDNA PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物)在4个水平上进行优化试验并对PCR扩增程序中的退火温度及循环次数进行了单因素梯度比较优化.建立了松毛虫mtDNA PCR反应的最佳体系即在50 μL体系中含模板150 ng、0.10 μmol/L引物、0.4 mmol/L dNTP、1.0UTaq DNA聚合酶、2.5 mmol/L Mg2+.同时通过PCR比较,确定最佳循环次数为35个循环,最佳退火温度为56 ℃,获得了松毛虫mtDNA PCR反应的最佳扩增程序.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高宝嘉	河北农业大学林学院	162	2190	21.0	40.0
3	张学卫	河北农业大学林学院	4	36	3.0	4.0
6	吴丽欣	河北农业大学林学院	3	7	2.0	2.0