葛根SCoT-PCR反应体系优化及引物筛选

• 作者: 严华兵 尚小红 张尚文 曹升 欧昆鹏 王艳 谢向誉
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 葛根 SCoT-PCR 反应体系优化 引物筛选
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子生物学
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: S567.03
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2018.01.01

摘要

[目的]优化葛根SCoT-PCR反应体系,筛选适用于葛根的SCoT引物,为利用SCoT分子标记进行葛根种质资源鉴定、遗传多样性分析及分子标记辅助育种提供技术支持.[方法]采用正交设计对SCoT-PCR反应体系中的DNA模板量、dNTPs浓度、Mg2+浓度、TaqDNA聚合酶量和引物浓度5个因素进行优化,利用最佳SCoT-PCR反应体系筛选出适用于葛根的SCoT引物,并对该体系进行验证.[结果]最佳葛根SCoT-PCR反应体系20.00μL:DNA模板50.00ng,dNTPs 0.25mmol/L,Mg2+1.50mmol/L,引物0.80μmol/L,TaqDNA聚合酶0.50U.利用该体系从36条SCoT引物中筛选出35条可从葛根中扩增出清晰条带的引物.使用3条引物对18个葛根材料进行PCR扩增,PCR产物表现出良好的重复性、稳定性和丰富的多态性.[结论]建立的最佳葛根SCoT-PCR反应体系和筛选获得的35条SCoT引物可适用于葛根种质资种鉴定、遗传多样性分析、相关分子标记开发等研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严华兵	广西农业科学院经济作物研究所	37	239	9.0	13.0
2	谢向誉		18	84	6.0	7.0
3	欧昆鹏	广西农业科学院生物技术研究所	15	90	6.0	9.0
4	王艳	广西农业科学院生物技术研究所	8	7	1.0	2.0
5	张尚文	广西农业科学院生物技术研究所	9	12	2.0	3.0
6	曹升		5	14	2.0	3.0
7	尚小红		3	12	2.0	3.0