石蒜属植物SCoT-PCR反应体系构建及优化

• 作者: 姜小凤 童再康 高燕会 黄春红
• 来源期刊: 浙江农林大学学报
• 关键词: 植物学 石蒜属 目标起始密码子多态性 PCR反应体系 正交设计 单因素试验
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 444-452
• 页数: 9页
• 分类号: S682.0
• 语种: 中文

摘要

建立并优化了石蒜属Lyc oris植物的目标起始密码子多态性-聚合酶链式反应(SCoT-PCR)反应体系,为研究石蒜属种质资源的遗传多样性、亲缘关系及遗传改良提供新的思路.采用L笛(56)正交试验和单因素试验2种方法优化石蒜属植物SCoT-PCR体系.得出石蒜属植物SCoT-PCR最佳反应体系:DNA模板2.0 mg· L-1,引物0.125μμmol·L-1,三磷酸碱基脱氧核苷酸(dNTPs)0.2 mmol·L-1,镁离子(Mg2+)3.0 mmol·L-1,Taq DNA聚合酶1.0×16.67nkat.对优化的反应体系进行通用性、稳定性及可靠性检测,结果均能获得丰富、稳定、清晰的DNA谱带.最后可知SCoT新型标记在石蒜属植物中应用效果良好,可为石蒜属植物以后的研究提供基础条件.