环丙沙星单克隆抗体的制备及其免疫学特性分析

• 作者: 姜有声 方伟 杨先乐 胡鲲 黄宣运
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 环丙沙星 单克隆抗体 亚型 亲和力 交叉反应
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 538-543
• 分类号: R446.6
• 字数: 7051字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2010.06.013

摘要

目的:制备环丙沙星单克隆抗体,并分析其免疫学特性,为建立环丙沙星残留的免疫学检测方法服务.方法:用人工抗原环丙沙星-小牛血清白蛋白偶联物免疫BALB/c小鼠,产生预期免疫应答后,将小鼠脾细胞与瘤细胞融合,经初筛、复筛和再克隆,筛选得到1C9、3F6、6H2、6A7、6G11和8F5 6株分泌环丙沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞.对单克隆抗体的亚型、纯度、亲和力、灵敏度及特异性等免疫学特性进行鉴定和分析.结果:1C9、3F6和6A7的抗体亚型为IgG2a;6H2和8F5的抗体亚型为IgG1;6G11的抗体亚型为IgG3.SDS-PAGE电泳结果显示单抗蛋白重链分子量约为50 kD,轻链分子量约为25 kD.6株细胞产生的单抗均具有良好的特异性和灵敏度.其中,细胞株1C9细胞培养上清和腹水效价分别为1:6.4×102和1:5.6×105,亲和力常数可达2.85×109 L/mol,IC50值可达245.86 ng/ml,最低检测限为45.25 ng/ml,对氧氟沙星、双氟沙星、沙拉沙星、左氧氟沙星、孔雀石绿、氯霉素、呋喃西林等药物几乎不存在交叉反应,与恩诺沙星存在交叉反应,交叉反应率为84.6%.结论:本方法制备的环丙沙星单克隆抗体具有较好的亲和力和特异性,可用于环丙沙星残留免疫学检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡鲲	上海海洋大学水产与生命学院	34	247	8.0	14.0
2	杨先乐	上海海洋大学水产与生命学院	69	353	10.0	16.0
3	方伟		17	29	3.0	4.0
4	姜有声	上海海洋大学水产与生命学院	11	55	5.0	7.0
5	黄宣运	上海海洋大学水产与生命学院	1	6	1.0	1.0